Upplösning av underenheter av trombin som enzymet Agapurin från Agkistrodon halys gift och sekvensering av aminosyrarester

[Sammanfattning] Mål Att bestämma de N-terminala 15 aminosyraresterna av två liknande subenheter av Agacutin.De två subenheterna av enzymmolekylen måste delas för att erhålla subenhetens enda peptidkedja och sekvenseras.Metoder Högrenat Agacutin erhölls genom biokemisk metod.Enstaka subenhetsprover för identifiering och sekvensering framställdes med SDS-PAGE-elektroforeseparation, subenhets adhesivremsor och PVDF-membranelektroöverföringsteknologi.Den senare bestämde 15 aminosyrarester vid N-terminalen av subenheten genom Edman-nedbrytningsmetod.Resultat Sekvensen för stor subenhet (16 kDa) var DCSSGWSSYEEHQYY och den för liten subenhet (15 kDa) var DSSGWSSYEGHEYYV.Slutsats Sekvenseringsresultaten visade att Agacutin var ett nytt ormgifttrombinliknande enzym genom att söka i NCBI-databasen.